胚胎胸腺移植是一项新开展起来的医疗技术,涉及适应证的选择、手术方法、术后免疫抑制处理、复合免疫组织移植和多次移植等内容。
1.适应证
胚胎胸腺组织移植是3种类型移植中最常用的一种,适用于能耐受腹部中、小手术的晚期肿瘤和免疫缺陷或免疫功能低下的各种疾病。具体适应证:①不能切除且又不能行肝动脉栓塞的晚期肝癌;②各种不能切除的除肝癌以外的恶性肿瘤;③作为化学治疗和放射治疗的辅助治疗手段;④与自身免疫有关的全身性多种疾,例如胰岛素依赖型糖尿病、支气管哮喘、牛皮癣、难治性肾病、多发性神经根炎、多发性大动脉炎、肌炎、播散性脑脊髓炎、脱髓鞘脊髓病;⑤因免疫功能低下而平素多病、身体虚弱的老年人。
2.方法
胚胎胸腺移植分为供体手术和受体手术两个部分。
(1)供体胚胎胸腺的切取与保存:妊娠5~8个月的引产死胎娩出后,置于4℃冰桶里,运送至手术室。将胎儿取出,严格消毒,沿胸骨切开,于胸腔上部和纵隔前面显露胸腺,剪断其周围小血管和附着组织,完整切除胸腺,立即将其置于1~4℃生理盐水中漂洗,再将其置于4℃的WMO‐1号保存液或其他器官保存液中保存。至此,手术转移到受者身上。
(2)受者手术:胚胎胸腺组织可经开腹移植于大网膜上,也可不经开腹而植入直肌或股四头肌中。分述如下:
大网膜组织片移植:在连续硬膜外麻醉或全身麻醉下,取受者上腹正中切口,长10~12cm,进腹探查,了解腹腔脏器有无器质性病变,遇有恶性肿瘤病灶时须活检。将大网膜置于腹腔外,择其血管丰富区剪开网膜浅层,稍加分离,使其呈一间歇袋状。将保存的胸腺取出,去掉外膜,剪(切)成0.5cm×0.5cm×0.1cm的胸腺组织薄片,植于大网膜的间隙袋中,注意放匀,切勿重叠,植毕,缝合“袋口”。移植区可安排3处,每处可植入胸腺薄片50块左右。然后,将植入了胸腺组织的大网膜片小心送回腹腔铺平,防止卷折。胸腺薄片植入大网膜具有血供丰富、容易存活的优点。胸腺组织块均匀排列在大网膜里,不致重叠而妨碍毛细血管伸入。由于大网膜间隙广泛,可供再行移植。此外,大网膜血液回流至肝,具有免疫“特惠”作用,可预防或减轻移植的胸腺组织被排斥。除大网膜外,肾囊、胆囊床等解剖区也是胸腺组织移植的合适部位。
肌肉间隙移植:将胸腺外膜去掉,置于研钵中加入少量无菌冰屑,一并捣磨,使呈匀浆状。用18号针头的20ml注射器吸入匀浆组织,选准受者的腹直肌或股四头肌区,消毒皮肤,局部麻醉,用尖刀片戳穿皮肤全层,握持吸有胸腺匀浆组织的注射器经皮肤创口按不同方向将胸腺匀浆注入肌肉间隙。拔出针头,无菌敷料覆盖伤口。另一种肌肉间隙移植方法是:切开皮肤、皮下组织,创口约3~4cm,显露肌肉,于不同部位钝性分离,使呈几个间隙,将胸腺匀浆植入其间,缝合鞘膜或肌膜、皮下组织和皮肤,无菌敷料覆盖伤口。
1.适应证
临床上常遇到全身情况极度衰竭、不能耐受手术和麻醉的恶性肿瘤患者,适于胚胎胸腺细胞移植。如极晚期肝癌,已有黄疸和腹水或伴远处转移,既不能手术切除和行肝动脉栓塞,也不能耐受开腹行胚胎胸腺组织移植,在这种情况下行胚胎胸腺细胞移植(输注)最为合适。
2.方法
胚胎胸腺细胞移植分为细胞悬液的制备和细胞移植(输注)两个步骤。
(1)细胞悬液的制备:按胚胎胸腺组织移植法获得胸腺后,去掉外膜,剪成0.5cm×0.5cm×0.5cm的组织小块,集中于XB‐Ⅱ型细胞悬液制备仪的容器中,加少量用生理盐水制成的冰屑与胸腺组织块混合,自动研磨,并用1~4℃平衡液或生理盐水200ml稀释。制备出的细胞悬液收集于盛有50ml(1~4℃)的枸橼酸葡萄糖液(ACD溶液)的盐水瓶中,用80~100目的筛网过滤。取4ml悬液,一半作细菌培养,一半作细胞计数及活力测定。一个胚胎胸腺可制备出10亿~100亿个胸腺细胞,即期活力达85%~95%,在4℃环境下保存6小时,活力仍达80%~85%。胚胎胸腺细胞悬液还可通过手工的方法制备。将胸腺外膜去掉后剪成小碎块集中于研钵里,加入生理盐水冰屑20g,用玻璃注射器的针芯将其捣碎、研磨,使之成匀浆状,倒入80~100目的钢丝筛网中过滤,用4℃平衡液100ml冲洗网中匀浆,大量胸腺细胞被滤出盛于碗中。又将网中残留的胸腺组织按上法重复捣碎,再用100ml冷平衡液冲洗滤出。然后将制备的200ml细胞悬液再次过滤集中于盛有50ml(1~4℃)的ACD液的盐水瓶中。至此,细胞悬液共250ml,抽出4ml分别作细菌培养和细胞计数与活力测定。
(2)细胞移植(输注):制备好的细胞悬液经外周静脉输注,细胞悬液中加入地塞米松5~10mg,按每分钟0~60滴的速度输入,1.5小时左右输注完毕。为防止细胞移植后的急性排斥反应和移植物抗宿主反应,于细胞移植前须从受者的外周静脉快速输注葡萄糖可的松溶液,其中50g/L葡萄糖100ml、琥珀氢化可的松250mg。必要时,可经静脉注射环磷酰胺100mg。
用吻合血管的方法施行胚胎胸腺移植,更有利于提高患者的细胞免疫功能,只要移植的胸腺不被排斥,机体的免疫功能便能长期保持。带血管的全胸腺移植是胸腺移植类型中最理想的一种。由于供应胚胎胸腺血流的动脉和收集该器官血液的静脉无粗大主干,所以血管吻合有一定难度,缺乏良好的显微外科技术,往往导致移植手术的失败。
1.适应证
凡适宜施行胚胎胸腺组织移植和细胞移植的患者,只要能耐受手术和麻醉,皆可施行带血管的全胸腺移植。具体地说,不能切除恶性肿瘤的患者、化学治疗和放射治疗期的恶性肿瘤患者和细胞免疫功能缺陷或不足的患者以及自身免疫性疾病的患者,均可接受这一手术治疗。郑州市整形烧伤科研究所和郑州市第一人民医院于1986年~1988年间,采用吻合血管的胚胎胸腺移植治疗恶性肿瘤3例、银屑病9例,均获得满意疗效。
2.方法
根据张卫经验,不同胎龄的胸腺,选择不同的移植部位,切取一个完整的带血管的胸腺与移植受区的动、静脉进行血管吻合。
(1)移植部位:移植部位可随胎龄而异,5~7个月龄的胚胎胸腺多选用肘窝,8~9个月龄者血管较粗,多选用股三角区、腹壁下动静脉区,及胃右动静脉区。
(2)移植受区血管的显露:①当移植受区选在肘窝处时,在臂丛麻醉下于肘前作“Z”形切口,切开皮肤的皮下组织,分离出头静脉、贵要静脉及正中静脉,其中的任何一支,均可作为受区静脉。在肱二头肌腱柱和其偏内侧的腱膜之间,找出桡动脉,一般在桡动脉的离心端分离出3~4cm长一段,安放两只微型血管夹,在两夹间剪断动脉,修剪动脉外膜,备作吻合用;②按同样方法,分离显露各受区的局部动脉和静脉约3~4cm,也安放微型血管夹,剪断修整,以作血管吻合。在股三角区,选用旋股外动脉和大隐静脉作吻合之血管。
(3)带血管胸腺的切取:死胎仰卧于平底器械盘上,周围放冰块,以减少热血时间。消毒铺巾,正中切开胸部皮肤,劈开胸骨,剪去两侧锁骨下动脉及其分支胸腺动脉,游离、切断、结扎其肋间分支。继而游离、切断、结扎两侧的锁骨下动脉及静脉、椎动脉及静脉和颈总动脉及静脉。然后切开心包,寻找主动脉的起始部。又于主动脉右侧小心分离出上腔静脉,夹钳后在两把钳之间切断,近心端缝扎,离心端暂时结扎,结扎线不剪断,
留作标记。分离出主动脉根部,置钳切断,离心端结扎,留标记线。最后显露主动脉,在主动脉弓的远端游离、夹钳、结扎近心端,也留线作标记。沿左迷走神经的喉返神经支找到肺动脉导管,切断结扎之。再将胸腺向左侧翻转,显露上腔静脉后方的奇静脉弓,切断、结扎之。至此,整个胸腺及其后方附着的大血管已基本游离。轻轻剥离周围疏松结缔组织及小血管,全胸腺即可被完整切取(图1)。用肝素利多卡因平衡液200ml轻轻冲洗大血管。冲洗毕,将胸腺置入Collins液或WMO‐1号保存液中暂时保存。
图1 胸腺切取与主要血供示意图
图2 股三角区胸腺移植
图3 肘窝区胸腺移植