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辐照红细胞制备及保存
概述

辐照红细胞(irradiated red blood cells,IRBC)是经过射线照射,灭活了活性淋巴细胞的红细胞成分血,称辐射红细胞,主要用来预防输血相关性移植物抗宿主病(transfusion-associated graft versus hot disease,TA-GVHD)的发生。

如受体与供体之间组织相容性不同,当免疫功能低下的受血者输入含有免疫活性淋巴细胞(主要是T淋巴细胞)的血液或成分血后,不被受血者免疫系统识别和排斥(无法清除T淋巴细胞),供血者淋巴细胞在受体内植活、增殖并攻击破坏受血者体内的组织器官及造血系统,称为输血相关性移植物抗宿主病(TA-GVHD)。采用辐照的方法则可灭活成分血中的活性淋巴细胞,达到预防TA-GVHD的目的。临床上常用γ和X射线辐照红细胞等成分血。

成分血辐照技术

1.原理

应用血液辐照仪发射出的射线辐照血液或成分血,通过放射性核素衰变中产生射线以核子或次级电子形式发挥电离辐射作用,具有敏捷、快速地穿透有核细胞,直接损伤有核细胞的DNA或间接依靠产生离子或自由基的生物损伤作用,使T淋巴细胞丧失有丝分裂的活性和停止增殖,有效灭活T淋巴细胞。用于血液辐照的射线有γ射线和X射线两种,前者的放射源主要是60Co(钴)和137Cs(铯),应用较广;后者一般由射线加速器远距离放射操纵并加速电子达到很高的速度产生冲击效果。

2.辐照剂量

辐照剂量以其对被照射物质的吸收量来计算,吸收剂量取决于照射量。吸收剂量以Rad或Gy(戈瑞)为单位,1Gy = 100rad = 100cGy。成分血最佳辐照剂量是完全破坏供血者淋巴细胞的有丝分裂能力而其他血细胞功能不被破坏,并以被辐照物质的吸收量来计算。美国食品药品监督管理局(FDA)在1993年把辐照中心剂量定为25Gy,其他部位不低于15Gy;欧洲学术委员会制定的辐射剂量范围是25~40Gy,英国为25~50Gy。国内一般推荐25~30Gy,辐照中心的靶剂量为25Gy,其他部位的剂量不低于15Gy,成分血任何点的辐照剂量不宜超过50Gy。一般认为辐照后淋巴细胞的反应抑制率大于95%,辐照剂量加大,虽可提高抑制率,但对红细胞、血小板的功能影响会增加。

3.血液采集后辐照时间和辐照后保存

红细胞应在采血后14天内进行,辐照保存期为14天(总保存时间不超过28天,比预期保存35天缩短7天),最好尽快输注,输注后体内恢复率应大于75%;辐照对血小板功能影响较小,可在保存期5天内任何时间以50Gy以下剂量辐照,并尽快使用。

4.注意事项

(1)成分血的最佳辐照剂量是完全消除供血者淋巴细胞的有丝分裂能力而不破坏其他血液细胞功能,必须注意选择照射剂量。

(2) 辐射作用只发生在瞬间,辐照后的血液及成分血没有放射活性,对受血者无任何放射损伤作用。

(3) 经冰冻融化处理的成分血,如冰冻红细胞、冰冻新鲜血浆、普通冰冻血浆、冷沉淀等,不需辐照处理,白细胞滤除不能替代血液辐照。

(4) 为了预防放射线的漏出,辐照仪周围用铅等物质做屏蔽,每年定期检测其自屏蔽效果。成分血辐照后应有标识,并标识大概剂量范围,以控制被辐照血液的质量。

5.辐照血液及成分血的适应证

(1)高危受血者

①免疫功能严重损害者,免疫缺乏症和免疫缺陷类疾病、大剂量化疗、接受嘌呤类和免疫抑制剂治疗、骨髓或外周干细胞移植、急性白血病贫血、白细胞< 0.5 × 109/L等患者;②免疫功能低下者,老年人(年龄大于50岁)、低体重的新生儿(< 1 500g)、早产儿等;③供血者与受血者有亲缘关系者(一般指一、二级亲属血液);④输血量较大者以及6个月以下的婴儿输血、新生儿溶血病换血等患者。

(2)高危血液成分

①必须辐照类,包括浓缩粒细胞、新鲜悬浮红细胞、新鲜全血、新鲜浓缩血小板、新鲜液体血浆等,均需要辐照;②最好辐照类,包括全血及各类红细胞、血小板。

辐照红细胞制备

1.制备方法

按照血液辐照仪说明书的要求,设置程序及参数,制备辐照红细胞。

2.保存

2~6℃保存;辐照应在全血采集后14天内完成。我国规定红细胞辐照后保存期为14天,美国血库协会(AABB)规定辐照后保存不超过28天,最好尽快输注,输血后体内恢复率应大于75%。

3.注意事项

(1)辐照实际操作时应按照不同厂家提供辐照仪的说明书要求进行。

(2) 每次进行血液辐射处理时,应放置辐射剂量测试条,以观察辐射剂量是否达标,如剂量不达标,应按未辐射红细胞供临床使用,但保存期同经辐照红细胞。

(3) 辐照后的红细胞应尽快使用,不宜长时间保存。

(4) 红细胞悬液经辐照后,对红细胞的功能有一定影响,随着时间的延长,红细胞的2,3-DPG、ATP、pH变化不大,但K+含量在1周内迅速升高。

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