单克隆抗体特异的血小板抗原固定试验(monoclonal antibody-specific immobilization of platelet antigens assay,MAIPA)是1987年Kiefel等报道的一项应用较为广泛的免疫学技术。血小板先结合人的同种抗体,然后与不同的抗血小板膜糖蛋白的(抗GPⅠb、GPⅡb、GPⅢa、GPⅨ、HLA等)鼠抗人血小板单克隆抗体孵育。经洗涤后裂解血小板,将产物移至包被的羊抗鼠IgG微孔板内,通过加入辣根过氧化物酶标记羊抗人IgG,经酶底物显色可以检测血小板膜糖蛋白特异的同种抗体(图1)。
该项技术的特点是敏感性强,如血小板膜上表达很少的HPA-5抗原,也能很好地检测出来。该技术可以仅固定GPs,因此可以去除血小板非特异性抗体,尤其是HLA抗体的干扰,单独检测HPA抗体。在疑为FNAIT时,采用本法可以对双亲进行配型,以检出许多低频的同种异体抗原。但是未知抗体检测必须使用一组单克隆抗体,后者不能对所有糖蛋白具有活性。患者体内的同种抗体与单克隆抗体和同一抗原决定簇反应,可能引起假阴性结果。
图1 MAIPA原理示意图