微柱凝胶交叉配血试验是在微柱卡孔的凝胶中填充特异性抗球蛋白介质,利用红细胞膜抗原和相应抗体在凝胶介质中进行凝集反应的试验,是一种免疫学检测新技术。
将供血者、受血者红细胞及血浆分别加入到含有抗人球蛋白试剂的微柱凝胶主侧和次侧微孔中,置37℃孵育器中孵育一定时间,如果血浆中存在针对红细胞抗原的血型抗体(IgM类或IgG类)时,红细胞发生凝集,红细胞凝集团块离心后留在微柱的表面,为阳性反应;如果血浆中不含有针对红细胞膜上血型抗原的抗体,红细胞下沉到微柱的底部,为阴性反应。
微柱凝胶抗人球蛋白卡及专用孵育器和离心机。
制备血浆及1%红细胞悬液→取受血者血浆25μl、供血者1%红细胞悬液50μl,分别加入到微柱主侧孔反应室内;吸取供血者血浆25μl、受血者1%红细胞悬液50μl,分别加入到微柱次侧孔反应室内→试剂卡37℃孵育15分钟→试剂卡离心10分钟→肉眼观察结果。
(1)相容
主侧管和次侧孔内红细胞完全沉降于凝胶孔底部,表明受血者与供血者血液相容,供血者血液可以输给受血者。
(2)不相容
若主侧孔和次侧孔或单独一侧微孔内红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中和/或出现溶血,提示受血者与供血者血液不相容。
(1) 用于交叉配血的是特异性抗人球蛋白凝胶检测卡,可同时检出IgG和IgM红细胞血型抗体。临床上一般运用6孔凝胶检测卡,可同时做3人次交叉配血,如做1人次,可只去除2孔的铝箔,保留其他孔下次配血用。
(2) 凝胶卡使用前要仔细检查凝胶中有无气泡、凝胶表面液体是否干涸。凝胶卡使用前先离心后再加样使用。
(3) 由于抗人球蛋白试剂在装配试剂过程中已加入到微柱凝胶内,进行离心时血清蛋白成分和红细胞因其各自的重力速度不同而以不同的速度通过凝胶柱,从而消除了血清中未结合的球蛋白与抗人球蛋白结合的可能性,因此,本试验红细胞可不洗涤,且对于阴性的结果也不再需要加入IgG血型抗体致敏的阳性细胞来验证阴性结果的有效性。