采用中性葡聚糖凝胶颗粒微柱凝集法,在盐水介质中,红细胞抗原和IgM抗体在微柱的“反应池”反应,经离心后凝集的红细胞留在微柱凝胶的表面,为阳性反应;未凝集的游离红细胞沉积于微柱凝胶底部,形成细胞扣,即阴性反应。
(1) 微柱凝胶血型卡:血型定型检测卡一般为6孔,前3孔分别添加IgM类抗-A、抗-B、抗-D单克隆抗体试剂,为正定型孔(特异性凝胶检测孔);第4孔为对照孔或质控孔(中性凝胶检测孔);第5、第6孔为ABO血型反定型孔(中性凝胶检测孔),见图1。
(2) 专用水平离心机等。
图1 ABO血型鉴定盐水法试管法凝集程度肉眼结果判断
制备待检1%的红细胞悬液→在正定型反应孔中分别加待检红细胞50μl→在反定型反应孔中分别加标准A型、B型红细胞悬液50μl→在反定型反应孔分别加待检血浆50μl→离心10分钟→观察、判读结果。
(1)阴性:
红细胞完全沉积于凝胶管底部,见图2。
(2)阳性:
红细胞留在微柱凝胶顶部或中部,凝集强弱判断见表1、图3。
表1 微柱凝胶法红细胞凝集强度结果判断
图2 ABO、RhD血型鉴定微柱凝集反应结果
图3 微柱凝集程度判断结果
血型卡:特异性凝胶检测孔只能用于正定型,中性凝胶检测孔可用于正、反定型。