不加热血清反应素试验（unheated serum regain test，USR）是一种改良的VDRL试验。将配制的VDRL抗原离心后的沉淀物重悬于含有乙二胺四醋酸（EDTA）、氯化胆碱和磷酸盐缓冲液中。由于EDTA可使抗原在12个月内不变质，氯化胆碱可起“化学灭活”的作用，因此，血清样本不需要加热灭活。USR抗原悬液与血清中的抗磷脂抗体（反应素）发生凝集反应，显微镜下观察结果。

人体感染梅毒螺旋体后3～4周后，产生针对受损组织细胞释放的类脂物质以及梅毒螺旋体自身的脂蛋白或心磷脂的抗体（亦称反应素），经规范治疗后，抗体的滴度逐渐下降，直至消失。因此，USR检测可用作活动性梅毒的诊断与疗效的判断。然而，在其他螺旋体感染或某些引起组织损伤的急性、慢性非梅毒疾病时，机体也可产生反应素抗体，需要结合特异性梅毒血清学试验进行鉴别。

（一）仪器设备

1.专用水平摇床

可定时4分钟，180r/min±2r/min，偏心轴驱动转盘，在水平位置上圆周偏转半径=2cm。

2.移液器

适用范围在10～100μl。

3.定量滴管

吸管配置45滴/ml±1滴/ml平头针头，校正后垂直滴加每滴的体积为22μl。

4.反应板

涂有直径14mm圆圈的一次性塑料（玻璃）反应板，圆圈边缘的胶漆或陶瓷防溢环可防止旋转时液体溢出，反应孔中间透明，便于直接在显微镜下观察。

5.保湿反应盒

含有湿润纱布的密闭容器，可放置反应板并防止反应液水分蒸发。

6.显微镜

目镜10×；物镜10×和40×。

（二）试剂

1.USR抗原 由心磷脂、卵磷脂和胆固醇结合物，混悬于EDTA、氯化胆碱、硫柳汞及磷酸盐溶液中。密封后保存于2～8℃，有效期在一年以上。

2.生理盐水。

3.内部阳性、阴性对照血清。

4.外部阳性对照血清。定性试验应包括阳性、弱阳性和阴性反应质控血清。定量试验的阳性反应质控血清滴度至少为1∶4。

血清样本适合于USR检测，血浆样本不适合该试验。合格的血清样本应清澈透明，不含有颗粒状物质，以免干扰结果的判断。血清样本发生溶血、乳糜或混浊，可影响试验结果。

血清：根据试验需求，采集静脉血为3～5ml于干净的真空非抗凝试管中。

1.试验区域适宜的温度18～29℃，湿度50%～80%。试验区域温度＞29℃会增加反应性，试验区域温度＜18℃会降低反应性。

2.为了防止液体蒸发，可将反应板置于湿盒中，使用USR专用水平摇床，180r/min±2r/min，共转动反应4分钟，立即置显微镜下观察。

3.“前带现象”是由于抗体浓度过高，导致抗原抗体反应的比例失调，而出现可疑的反应或阴性反应。当稀释血清样本后，出现阳性反应。常见于二期梅毒。

4.治疗后梅毒患者随访时，USR滴度应与上次的检测结果比较，如无法解释结果时，应重复测定。