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快速尿素酶试验
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英文名称
rapid urease test
概述

检测幽门螺杆菌的快速尿素酶试验(rapid urease test)是继幽门螺杆菌培养、组织学检测后发明的第3种侵入性检测方法。培养需要特定条件和时间(3~5天),组织学检测需要有经验的病理医生,而快速尿素酶试验仅用肉眼观察就可在30分钟内得到结果,因此该检测在1985年后很快成为最常用的侵入性幽门螺杆菌检测方法。

原理

研究发现约97%的幽门螺杆菌菌株表达高活性的尿素酶(脲酶),尿素酶蛋白约占细菌菌体的30%,而人体胃黏膜细胞本身不表达尿素酶,“过路”菌也无如此高的尿素酶活性。因此,根据幽门螺杆菌具有高活性尿素酶这一特性设计了快速尿素酶试验用于辅助诊断幽门螺杆菌感染。检测原理为在含尿素的溶液中幽门螺杆菌尿素酶分解尿素产生氨(NH3),导致溶液pH上升,可以通过检测溶液pH改变,或有无NH3的产生,来判断有无尿素酶存在和尿素酶相对活性。检测溶液pH改变方法的检验试剂为含尿素和酚磺酞的低离子强度缓冲液(5~10mM),pH为6.8~7.2。检测有无NH3产生方法的检验试剂:①含尿素的低离子强度缓冲液(5~10mM),pH为6.8~7.2;②奈氏试剂检测NH3。

检查方法
此内容为收费内容
注意事项

1. 缓冲液

检验试剂缓冲液磷酸盐或Tris-盐酸均可;离子强度不易过高,一般不大于20mM,否则易导致假阴性的发生。反应时间一般为5~30分钟,延长时间可提高幽门螺杆菌的检出率,但假阳性率也会随之增加。

2. pH指示法

采用pH指示法时所有试剂应避免受酸碱污染;采用奈氏试剂法时灵敏度较高,但应避免环境中NH3的污染。由于奈氏试剂由饱和碘化汞(HgI2)和碘化钾(KI)配成,含有的汞(Hg2+)可污染环境,一般不推荐临床上采用该方法检测。

3. 影响因素

近期应用抗生素、铋剂、质子泵抑制剂等药物,5天内有上消化道出血者,检查敏感性会降低。因幽门螺杆菌在胃内呈灶性分布,活检取材部位与幽门螺杆菌分布范围不同,易引起假阴性。取胃窦和胃体多块胃黏膜组织可提高幽门螺杆菌检出率。

方法学评价

对几种幽门螺杆菌感染检测方法进行比较发现,快速尿素酶试验具有较高的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值,且与其他检测方法相比并无显著性差异,文献报道其敏感性为80%~95%、特异性为95%~100%。价格低廉、反应迅速、操作方便是该试验的优点,为胃镜检查时最常采用的方法。而缺陷在于该试验必须通过胃镜检查操作,属侵入性检查。此外,该试验反应强度取决于:①活检标本内的细菌密度:当幽门螺杆菌菌量>106cfu时30分钟内出现阳性反应,菌量为103~106cfu时2小时内出现阳性反应,幽门螺杆菌菌量<103cfu时为阴性;②受“灶性”分布影响,不宜将该单项检查作为重要检测对象(消化性溃疡出血、胃MALT淋巴瘤等),针对无幽门螺杆菌感染的判断,必须结合其他检测方法进行判断。

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