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EB病毒抗体测定
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英文名称
Epstein Barr virus;EBV;human herpesvirus 4;HHV-4
概述

EB病毒(Epstein Barr virus,EBV),又称人类疱疹病毒(human herpesvirus 4,HHV-4)。是Epstein和Barr于1964年首次成功地将Burkitt非洲儿童淋巴瘤细胞通过体外悬浮培养而建株,并在建株细胞涂片中用电镜观察到疱疹病毒颗粒。该病毒是多种恶性肿瘤(如鼻咽癌)的病因之一,它主要感染人类口咽部的上皮细胞和B淋巴细胞。

EB病毒呈圆形,直径180nm,基本结构含核样物、衣壳和囊膜三部分。核样物为直径45nm的致密物,主要含双股线性DNA。衣壳为20面体立体对称,由162个壳微粒组成。囊膜由感染细胞的核膜组成,其上有病毒编码的膜糖蛋白,有识别淋巴细胞上的EB病毒受体与细胞融合等功能。此外,在囊膜与衣壳之间还有一层蛋白被膜。

原理

1. ELISA法检测EB病毒VCA IgA抗体

微孔反应板上包被有EBV VCA重组抗原,在包被孔中分别加入阴性对照、阳性对照和待测标本,如存在EBV VCA IgA抗体,将与固相EBV VCA重组抗原相结合;通过洗涤洗去未结合的成分,再加入酶标抗人IgA,在板孔内温育,固相特异性的抗原-抗体复合物中IgA成分与酶标抗体相结合;再通过洗涤洗去未结合的成分,加入底物在板孔内温育,固相复合物中的酶与底物反应后产生颜色,酶标仪检测OD值,从而定性检测标本中的EB病毒VCA IgA抗体。

2. ELISA法检测EB病毒VCA IgG抗体

采用间接法原理测定样品中EB病毒VCA IgG抗体( VCA IgG),以纯化EB病毒VCA抗原包被酶联板。分别将待测标本、阴性对照、阳性对照加至包被孔中,如存在EBV VCA IgG抗体,将与固相EBV VCA抗原相结合;通过洗涤洗去未结合的成分,再加入酶标抗人IgG抗体,在板孔内温育,固相特异性的抗原-抗体复合物中IgG成分与酶标抗体结合;再通过洗涤洗去未结合的成分,加入底物显色,用酶标仪测定OD值判定有无EB病毒VCA IgG抗体的存在。

3. ELISA法检测EB病毒VCA IgM抗体

采用捕获法原理测定标本中EB病毒VCA IgM抗体,微孔中预包被鼠抗人-IgM(μ链),分别加入阴性对照、阳性对照和待测标本后,微孔中IgM抗体可被捕获,未结合的其他成分将被洗涤除去;加入EBV VCA抗原酶标记物,被捕获的IgM中的VCA IgM与HRP标记的VCA重组抗原特异性结合,洗去其他未结合物,用TMB底物显色。酶标仪检测OD值判定样品VCA IgM抗体存在与否。

4. ELISA法检测EB病毒EA IgG抗体

采用间接法原理检测待测标本中EB病毒早期抗原IgG抗体(EA IgG),以纯化EB病毒EA抗原包被微孔板。微孔中EA抗体与包被抗原反应,再与酶标记鼠抗人IgG抗体结合,形成抗原-抗体-酶标抗体复合物;加底物TMB显色,酶标仪检测OD值从而判定有无EB病毒EA IgG抗体的存在。

5. ELISA法检测EB病毒核抗原(EBNA1)IgG抗体

采用间接法原理测定待测标本中EB病毒核抗原(EBNA1)IgG抗体,以纯化EBNA1包被微孔板。孔中EBNA1抗体与包被抗原结合,再与酶标记鼠抗人IgG抗体结合,形成抗原-抗体-酶标抗体复合物;加底物TMB显色,用酶标仪测定OD值判定有无EBNA1 IgG抗体的存在。

适应证

是EB病毒感染时必做的检查项目。

标本要求

采自手臂静脉的血液样本。

检查方法
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临床意义
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注意事项

当待测标本S/CO值在cut-off值±20%之间,即灰区范围时,建议双孔复检该标本,当复检结果仍为阳性时,则报告阳性;当结果为阴性时则报告阴性。

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