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血清铁(serum iron，SI)以Fe3+形式与转铁蛋白(transferrin，Tf)结合存在，降低介质pH及加入还原剂(如抗坏血酸、羟胺盐酸盐等)能将Fe3+还原为Fe2+，则转铁蛋白对铁离子的亲和力降低而解离，解离出的Fe2+与显色剂(如亚铁嗪或α，α'-联吡啶等)反应，生成有色络合物，同时作标准对照，计算出血清铁的含量。
采用血清或血浆，血清首选，血浆用肝素锂抗凝。标本量1.0ml，至少0.5ml。分离后标本在室温（25℃）、冷藏（4℃）或冷冻（－20℃）稳定保存14天。可反复冻融3次。
1. 血清铁有明显的昼夜规律，上午高于下午，晚上则更低，其波动范围可达20%～30%。因此监测血清铁，尤其是观察疗效时，应注意标本采样时间一致。
2. 血清本身的色度可干扰检测，检测时应做空白对照;溶血标本、严重脂血标本以及使用肝素钠抗凝血浆的标本会影响测定结果。
3. 所用的玻璃器材必须用10%(V/V)盐酸浸泡24小时，取出后再用去离子冲洗后方可应用，并避免与铁器接触，以防止污染。
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