轮状病毒是引起婴幼儿腹泻的主要病原体之一,其主要感染小肠上皮细胞,从而造成细胞损伤,引起腹泻。轮状病毒每年在夏秋冬季流行,感染途径为粪-口途径,临床表现为急性胃肠炎,呈渗透性腹泻病,严重者可出现脱水症状。
轮状病毒( Rotavirus,RV)是一种双链核糖核酸病毒,属于呼肠孤病毒科。它是全球范围内婴幼儿腹泻的主要病因,也能引起较大儿童和成人腹泻。核心为双股链状RNA,它有11个RNA片段,分A~G7个组,其中A组致婴幼儿腹泻,B组与成人腹泻有关,C组虽可引起人类腹泻但较少,人类轮状病毒感染超过90%的案例也都是由该组造成的。根据A组中和抗原VP7的多态性,至少可分为14个血清型。
采用胶体金标记单克隆抗体和多克隆固相抗体来选择性检测轮状病毒抗原。用含有提取液的试管收集粪便标本,在测试卡的标本池中加入几滴粪便提取液,当待测标本流经吸水材料时,胶体金标记的抗体与轮状病毒抗原结合。形成抗原-抗体复合物,层析至反应区,与包被的抗RV多克隆抗体结合,出现红色条带;未与轮状病毒抗原结合的胶体金标记抗体继续向前移动,至对照区(质控区)与该区预包被的羊抗鼠IgG反应,呈现红色条带。
用兔抗轮状病毒抗体包被反应板微孔,待测粪便如含有轮状病毒抗原,则可将其捕获形成固相兔抗轮状病毒抗体-轮状病毒抗原复合物。洗去未结合物,再与随后加入的酶( HRP)标记抗轮状病毒抗体反应,形成固相兔抗轮状病毒抗体-轮状病毒抗原-酶标记抗轮状病毒抗体复合物。洗去未结合物后,再加入酶底物/色原显色,呈色程度可反映待测粪便中轮状病毒抗原的有无与浓度。
一般试剂包括:预包被的试纸条、阴性对照和阳性对照。
试剂组成:包被轮状病毒抗体的微孔板、酶标记的抗体、酶底物显色溶液以及阴性对照、阳性对照、浓缩洗涤液等。