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L-γ-谷氨酰基转移酶测定
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英文名称
L-γ-glutamyl transferase
别名
GGT
概述

L-γ-谷氨酰基转移酶(L-γ-glutamyl transferase,GGT)是一种肽酶,催化γ-谷氨酰基移换反应。GGT仅作用于含末端谷氨酸残基且以γ-羧基(末位羧基)与其他基团相连的肽(如谷胱甘肽)或肽样物质,转移γ-谷氨酰基至其他物质(肽、氨基酸、水等)。GGT主要分布于肾、肝、胰、小肠等。血清中的GGT主要来自肝脏。GGT存在于细胞质,但大部分分布于细胞膜上。血清GGT测定有比色法、速率法等,比色法现已少用。速率法早期曾使用L-γ-谷氨酰-对硝基苯胺为底物,但该底物的溶解度较小,很难达到饱和底物浓度,不能显示酶GGT的最大活性,后来的方法多以水溶性良好的L-γ-谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺为底物。1983年国际临床化学联合会(IFCC)提出GGT测定推荐方法,2002年IFCC在推荐方法基础上提出GGT测定参考方法,用于血清GGT测定标准化。本节介绍目前应用较多的以L-γ-谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺为底物的速率法。

原理

血清GGT催化L-γ-谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺向甘氨酰甘氨酸(绝大部分)和L-γ-谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺本身(约1%)的L-γ-谷氨酰基转移反应,释放5-氨基-2-硝基苯甲酸。5-氨基-2-硝基苯甲酸在410nm波长处有较强吸收。在底物过剩的情况下,5-氨基-2-硝基苯甲酸的生成速率与血清GGT浓度成正比,因而可通过监测5-氨基-2-硝基苯甲酸生成速率测定血清GGT活性浓度。GGT活性测定的反应式如下:

引自:全国临床检验操作规程.第4版.ISBN:978-7-117-19862-2.主编:尚红 王毓三 申子瑜

标本要求

空腹,肘静脉采血,单项测定3ml。红头管或黄头管,室温2小时内送检,4°C稳定7天。

检查方法
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参考区间
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临床意义
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注意事项

 1.  定标品要求

样品GGT浓度过去常用由5-氨基-2-硝基苯甲酸的摩尔消光系数推导的校准因子计算,但各种常规方法很难完全重复IFCC推荐方法的试剂组成和反应条件,由此会造成测定结果差异。目前认为,血清GGT测定需用定值可溯源至IFCC参考方法的定标品校准。

2.  方法学特点

甘氨酰甘氨酸是L-γ-谷氨酰基的良好接受体,以甘氨酰甘氨酸作L-γ-谷氨酰基接受体,GGT表现较高活性。甘氨酰甘氨酸试剂中往往含有甘氨酸杂质,而甘氨酸是GGT抑制剂,甘氨酰甘氨酸中0. 2%的甘氨酸杂质可降低GGT测定结果1%~1. 5%。方法中所用的吸光度监测波长不是5-氨基-2-硝基苯甲酸的最大吸收波长,处于吸收曲线的下降段,故波长准确性影响测定结果,1nm波长变化可引起约3%结果变化。

3.  标本类型及稳定性

血清是GGT测定的适宜标本,可用EDTA血浆。肝素可使反应液浑浊,枸橼酸盐、草酸盐、氟化物等抑制GGT,因此以这些物质做抗凝剂的血浆不宜用作GGT测定。红细胞GGT含量很低,故轻度溶血对GGT测定影响不明显。血清GGT相对稳定,4℃下至少可稳定一个月,-20℃下至少一年。

影响因素

严重溶血、脂血、黄疸影响测定,肝素抗凝血浆可引起重氮法反应液浑浊,草酸盐、柠檬酸盐和氟化物可抑制酶活性,嗜酒、苯巴比妥、苯妥英钠、安替比林及口服避孕药可升高。

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