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脂肪酶测定
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英文名称
lipase
别名
LPS;血清脂肪酶
概述

脂肪酶(lipase,LPS)是一组催化长链脂肪酸甘油酯水解的酶。LPS只水解脂肪酸甘油酯的α位(1位和3位)脂肪酸,生成两分子游离脂肪酸和2-脂肪酰甘油,但2-脂肪酰甘油可自动异构化为1-脂肪酰甘油而被LPS水解。LPS对长链脂肪酸甘油酯有一定特异性。LPS最大活性和特异性的发挥或表现需胆酸盐和共脂肪酶(colipase)的参与。血清LPS主要来源于胰腺,少量来自胃肠黏膜。血清LPS测定方法有多种,本节介绍目前应用较多的色原底物法和酶偶联显色法。

原理

(一)色原底物法

血清LPS催化合成底物1,2-邻-二月桂基-消旋-甘油-3-戊二酸-(6-甲基试卤灵)酯的水解反应,生成1,2-邻-二月桂基-消旋-甘油和戊二酸-(6-甲基试卤灵)酯,后者自发水解,产生红色甲基试卤灵,通过监测甲基试卤灵的生成速率测定LPS活性。血清LPS测定的反应式如下:

(二)酶偶联显色法 

血清LPS催化1,2-二脂肪酰甘油水解,生成2-脂肪酰甘油和脂肪酸,2-脂肪酰甘油在单脂肪酰甘油脂肪酶作用下水解为甘油和脂肪酸,甘油在甘油激酶作用下被ATP磷酸化,生成α-磷酸甘油,α-磷酸甘油在磷酸甘油氧化酶作用下被氧化为磷酸二羟丙酮和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶作用下使色原物质(4-氨基安替比林和苯胺衍生物)缩合产生有色物质(Trinder反应),可通过比色法测定。血清LPS测定的酶偶联反应式如

标本要求

1.  空腹采静脉血3.0ml(血清或肝素锂抗凝血浆)。

2.  全血室温稳定2小时,血浆/血清常温稳定7天,2~8℃稳定3周,-20℃和-80℃稳定数月。

3.  应该避免溶血和细菌污染。

检查方法
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参考区间
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临床意义
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影响因素

胆固醇、甘油三酯等的测定试剂中含脂肪酶,需注意交叉污染。

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